摘要:
目的 研究发酵条件对蛇足石杉支项孢属内生真菌2F09P03B石杉碱甲生成的影响,并探讨发酵条件的优化.方法 通过测定2F09P03B生长曲线、石杉碱甲积累曲线和培养液pH值随时间的变化情况,了解该菌株的培养特性;考察不同碳源和氮源对石杉碱甲积累的影响.在单因素试验的基础上,利用正交试验优化培养基碳源、氮源组成;考察MgSO4、KH2PO4、NaCl、CaSO4对石杉碱甲生成的影响,确定无机盐组成;优化接种量、发酵时间、培养温度、摇床转速等发酵工艺条件.结果 菌株2F09P03B的最佳培养基组成为:马铃薯150 g/L,玉米粉30 g/L,麦芽糖25 g/L,酵母膏10 g/L,麸皮30 g/L,KH2PO41.5 g/L,MgSO4 0.5 g/L,NaCl 0.3 g/L,CaSO4 0.3 g/L,pH自然;最佳发酵工艺条件为:接种量8%,发酵时间10d,培养温度28℃,摇床转数140 r/min.在此条件下,发酵液中石杉碱甲含量为8.17 μg/L,最高达到8.32 μg/L,约为其干重的0.07%左右.结论 发酵条件对菌株2F09P03B石杉碱甲产量有明显影响.优化后的发酵条件可使该菌株石杉碱甲产量明显提高,有望成为石杉碱甲新药源.
