摘要:
目的通过研究鳖甲煎丸对肝细胞癌中Wnt信号通路及抑制基因DKK-1、FrpHe表达的影响，探讨其抗肝细胞癌转移侵袭的作用机制与Wnt／β-catenin信号通路的关系。方法24只Wistar大鼠随机分为3组（8只／组），分别以临床剂量的20倍、10倍的鳖甲煎丸和生理盐水灌胃3d，3d后采血，离心，获取血清。分别将3组血清加入DMEM培养液中培养肝癌细胞HepG2，48h后采用流式细胞术检测细胞中的D．catenin蛋白含量，qRT-PCR法检测DKK-1、FrpHe基因的表达情况，以进一步阐明药物的作用机制与Wnt／β-catenin信号通路的关系。结果流式细胞术结果：高剂量组和中剂量组含药血清均可显著降低细胞中β-catenin蛋白表达，且该作用与药物浓度有关。RT-PCR结果：高剂量组和中剂量组含药血清均可显著下调DKK-1基因的表达，且该作用与药物浓度有关。而高剂量组和中剂量组含药血清对FrpHe基因的表达影响不明显。结论鳖甲煎丸能显著抑制肝细胞癌的生长、粘附和转移，且这种抑制作用与显著降低肝癌细胞中β-catenin蛋白表达、显著下调DKK-1基因的表达，从而阻断wnt／β-catenin信号通路有关。
