肝爽颗粒对HSC—T6细胞ColⅠ、ColⅢ、TIMP1基因及蛋白表达的影响

目的：观察肝爽颗粒对HSC-T6细胞Ⅰ型胶原（Collagen Ⅰ，ColⅠ）、Ⅲ型胶原（Collagen Ⅲ，ColⅢ）、基质金属蛋白酶组织抑制因子1（Tissue Inhibitor of Metalloproteinase 1，TIMP1）基因及蛋白表达的影响。方法：用浓度0．025、0．05、0．1、0．15、0．2、0．35、0．5、1．0、1．5、2．0、4．0、8．0、16．0mg/ml肝爽颗粒作用于HSC-76细胞48小时，采用MTT比色法观察其对HSC—T6细胞生长的影响；以0．05、0．1、0．2mg／ml肝爽颗粒作用于HSC—T6细胞48小时，采用逆转录PCR与ELISA方法分别测定其对HSC-T6细胞ColⅠ、ColⅢ、TIMP1基因及蛋白表达的影响。结果：空白对照组ColⅠ、ColⅢ、TIMP1基因表达水平分别为0．91±0．11、1、54±0．09、1．83±0．13辉度值，蛋白表达水平分别为（187．63±4．11）、（7．59±1．04）、（23．85±2．13）ng／ml，以0．05、0．1、0．2mg/ml肝爽颗粒作用于HSC—T6细胞48小时，浓度0．05mg／ml肝爽颗粒仅能降低ColⅠ蛋白的表达；当浓度升为0．10mg／ml时不仅可显著降低ColⅠ蛋白的表达，而且对Col ⅢmRNA与蛋白的表达亦产生明显抑制作用；当浓度达到0．20mg／ml时作用更明显，可显著降低ColⅠ、ColⅢmRNA，ColⅠ、Col Ⅲ、TIMP1蛋白的表达。结论：肝爽颗粒能明显抑制HSC—T6细胞ColⅠ、ColⅢ基因表达，抑制ColⅠ、ColⅢ、TIMP1蛋白表达，从而可抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成，减弱TIMP1对基质金属蛋白酶的抑制作用，这可能是其抗纤维化的作用机制之一。