摘要:
目的：验证实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测绒促性素（HCG）和尿促性素（HMG）生产工艺中尿液、粗品和原料药中乙肝病毒DNA（HBV DNA）的方法,并用该方法对HCG和HMG生产工艺中关键点进行控制。方法：在不同浓度的乙肝阳性血中添加HCG或HMG的尿液、粗品和原料药,用Real-time PCR方法检测添加前后不同浓度乙肝阳性血中HBV DNA的浓度,计算出HBV DNA回收率,同时验证该方法的线性、重复性和灵敏度;用Real-time PCR方法对尿液、粗品和原料药样品进行HBV DNA检测,将检测出阳性的样品用ELISA方法检测,比较2种方法的检测结果差异。结果：Real-time PCR检测HBV DNA在104～107IU.mL-1范围内线性关系良好,r2=0.9969;HCG或HMG尿液、粗品和原料药中添加不同浓度乙肝阳性血,HBV DNA回收率为94.9%～103.8%;3次重复实验相对标准偏差（RSD）均小于5%;最低检出限为500 IU.mL-1。Real-time PCR检测出阳性的样品用ELISA方法检测乙肝表面抗原（HBsAg）均为阴性。结论：Real-time PCR可用于HCG和HMG生产工艺中尿液、粗品和原料药中HBV DNA的检测,同时也是用ELISA检测HCG和HMG中HBsAg的一种补充手段。
