摘要:
目的：建立同时测定红细胞（RBC）中硫鸟嘌呤核苷一、二和三磷酸（TGMP,TGDP,TGTP）浓度的HPLC-荧光检测法,并应用于口服硫唑嘌呤（AZA）肾移植患者体内代谢物测定。方法：RBC中单个硫鸟嘌呤核苷酸首先经二氯甲烷提取,随后加入高锰酸钾溶液进行氧化后荧光检测（激发波长315 nm;发射波长390 nm）。色谱柱：Nucleosil C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;柱温：30℃;流动相：20 mmol·L^-1磷酸钾缓冲液（p H 6.8,加入5 mmol·L^-1四丁基硫酸氢铵）-乙腈（80∶20）;流速：1.0 ml·min^-1。结果：TGMP,TGDP和TGTP在50-500 pmol·ml^-1RBC,50-1 000 pmol·ml^-1RBC和100-5 000 pmol·ml^-1RBC浓度范围内线性关系良好。TGMP、TGDP、TGTP最低定量限分别为50,50,100 pmol·ml^-1RBC。3种代谢物的日内及日间精密度RSD均〈7.0%,方法回收率为95.0%-103.6%,平均提取回收率均〉90%。服用AZA的30名肾移植患者RBC内TGTP为主要代谢物。结论：该法操作简便、快速、灵敏、专属性强,可应用于AZA治疗肾移植患者体内单个硫鸟嘌呤核苷酸浓度的测定。
