摘要:
目的探讨水通道蛋白1（AQP1）抑制剂乙酰唑胺（AZ）对IL-1β诱导的大鼠关节软骨细胞凋亡的影响及机制。方法分离培养大鼠关节软骨细胞主要采用胰酶-胶原酶法,IL-1β诱导软骨细胞凋亡,AZ体外处理IL-1β刺激的关节软骨细胞,MTT法检测细胞增殖,hoechst 33258染色、Annexin V-FITC/PI双染和rhodamine-123染色检测细胞凋亡,Western blot法检测AQP1、Bcl-2、Bax、Caspase3、IκBα、pIκBα、NF-κB p65和p-NF-κB p65的蛋白表达。结果 AZ（12.5、25、50μmol/L）剂量依赖性地提高IL-1β诱导的软骨细胞增殖;AZ可以抑制IL-1β诱导的大鼠关节软骨细胞凋亡,表现为减少细胞凋亡形态学改变、降低软骨细胞凋亡率和提高软骨细胞线粒体膜电位;与正常组比较,IL-1β组AQP1蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达降低,Bax和Caspase3蛋白表达升高,IκB蛋白表达下降,p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白表达增加;与IL-1β组比较,AZ抑制AQP1表达,提高Bcl-2表达,降低Bax和Caspase3表达,抑制IκBα的降解和磷酸化,并减少p-NF-κB p65蛋白表达。结论 AZ体外能抑制IL-1β诱导的关节软骨细胞凋亡。该项结果可能与下调Caspase3和Bax（均为促凋亡基因）表达、上调Bcl-2（抗凋亡基因）表达及抑制NF-κB炎症通路活化有关。
