医用胶原修复膜病毒灭活/去除工艺的验证和评价

目的验证和评价医用胶原修复膜制备工艺中过氧化氢溶液、低p H孵放和γ射线辐照灭活/去除病毒的可行性。方法以水疱性口炎病毒（vesicular stomatitis virus,VSV）、伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）、呼肠弧病毒Ⅲ（respiratory enteric orphan virusⅢ,Reo 3）、猪细小病毒（porcine parvovirus,PPV）作为指示病毒,采用非洲绿猴肾细胞（Vero）和猪肾细胞（PK-15）进行病毒增殖和感染性评价,Karber法测定病毒滴度;分别对牛腱片样品进行3%过氧化氢、低p H孵放处理（pH 3.4±0.3）,检测病毒灭活/去除效果;将医用胶原修复膜中间品进行^60Coγ射线辐照（剂量为25 k Gy）,检测病毒灭活/去除效果。结果经3%过氧化氢溶液处理1 h后,样品VSV和PRV的病毒灭活值均大于4 Logs;经低p H孵放处理14 d后,样品中已检测不到VSV和PRV,病毒灭活值分别为6.55和5.59 Logs;经25 k Gy剂量^60Coγ射线辐照处理后,样品中VSV、PRV、Reo3和PPV均被有效灭活,病毒灭活值分别为5.64、4.35、4.87和5.36 Logs。结论医用胶原修复膜制备工艺中的3种灭活/去除病毒步骤均有效,经灭活/去除病毒后的产品质量安全可靠。