摘要:
目的探讨miR．424在人脂肪来源间充质干细胞（hASC）成骨分化中的表达及miR-424对hASC体外成骨分化的生物学作用。方法qPCR检测miR-424在hASC成骨分化不同阶段的表达水平。通过慢病毒颗粒在体外感染hASC，使miR-424过表达或抑制其表达，进行Westernblotting、细胞免疫荧光试验及碱性磷酸酶（ALP）和茜素红（ARS）染色试验，研究miR-424对骨形态发生蛋白2（BMP-2）及成骨诱导液诱导hASC成骨分化过程的影响。预测miR-424的靶基因，并利用qPCR及Westernblotting验证。结果qPCR结果显示miR-424在hASC的表达量随着成骨诱导时间延长逐渐下降（P〈0．05）。在BMP-2诱导下，过表达组的碱性磷酸酶（ALP）和骨桥蛋白（OPN）蛋白水平均下降，而抑制组的表达增加（P〈0．05）。细胞免疫荧光显示，过表达miR-424的细胞骨唾液酸蛋白（BSP）阳性率显著下降（P〈0．05）。ALP和ARS染色显示，过表达组ALP活性降低，钙盐沉积下降，而抑制组ALP活性升高，矿化能力增强。过表达miR-424能降低hASC中Smad5的mRNA和蛋白水平，而抑制miR-424则使其水平升高（P〈0．05）。结论miR-424在hAsc成骨分化中表达下谰苴存hASC佐钋盹罟分仙十寸程申规柳制作用.
