摘要:
目的： 研究双氢青蒿素（DHA）在体外对Con A诱导的小鼠T细胞增殖的影响,探讨其可能的免疫作用机制。方法： 加入不同浓度DHA,以多克隆刺激剂刀豆蛋白A（Con A）诱导T细胞活化增殖,用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFDA-SE）染色法分析T细胞增殖情况;利用流式细胞术（FCM）结合双色免疫荧光染色技术检测CD3＋T细胞早、中、晚期活化标志CD69、CD25、CD71表达情况;用Fluo-4/AM荧光钙离子探针技术检测细胞内钙离子（［Ca2＋］i）浓度的变化;以碘化丙锭（PI）染色分析细胞周期分布;运用流式细胞术（FCM）结合三色荧光染色技术检测CD4＋CD25highTreg早期活化抗原CD69表达情况。结果： CFDA-SE染色结果显示,DHA能有效抑制Con A诱导的T细胞增殖,并呈时间-剂量依赖性;DHA对Con A刺激的CD3＋T细胞CD69、CD25的表达有促进作用,而对CD71的表达有抑制作用,均呈剂量依赖性;DHA单独作用不能引起T细胞［Ca2＋］i的升高,在Con A的刺激下能引起［Ca2＋］i浓度升高;PI染色流式分析结果显示,DHA阻滞细胞于G0/G1期,阻止细胞进入S期和G2/M期;DHA能够下调CD4＋CD25highTreg细胞CD69的表达。结论： DHA对小鼠淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。
