摘要:
目的：观察放线菌素D作用下HEPG2细胞中与增殖相关的核仁蛋白B23（nucleophosmin or NPM，numatrin，NO38）定位和表达水平的改变，并探讨其可能机制和意义。方法：应用低浓度的放线菌素D处理HEPG2细胞，采用流式细胞仪技术、免疫印迹、免疫荧光、双向电泳及免疫共沉淀等实验方法检测HEPG2生长周期、B23蛋白表达水平及其定位、B23的等电点及磷酸化状态变化。结果：放线菌素D处理后，HEPG2细胞出现生长抑制，细胞周期阻滞于S／G2期；B23蛋白表达量没有变化，但定位改变，即从核仁移位到核浆，撤药后，B23又从核浆回到核仁上；B23在加药前后未检测到等电点和磷酸化状态改变。结论：低浓度放线菌素D抑制HEPG2细胞生长、阻滞细胞在S／G2期并引起可逆性的B23蛋白移位，而B23蛋白的表达量及磷酸化水平没有改变，这些实验结果对肿瘤药物治疗及分子肿瘤学研究可提供参考的研究模型。
