摘要:
目的通过建立癌痛动物模型,探讨芷辛方的镇痛作用及对骨癌痛大鼠模型中脊髓胶质细胞蛋白[胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、CD11b]表达以及Toll受体（Toll-like receptors,TLRs）和核因子κB（NF-κB）的影响。方法将20只SD雄性大鼠随机分为空白组（10只）、骨癌痛模型组（10只）,通过左胫骨内接种含有3×10~3个Walker256嫁接的腹水瘤细胞液造模,并对这两组的大鼠进行行为学检测、X光片检测及HE染色的检测证实造模成功。依照此法将70只雄性SD大鼠随机分为7组,每组10只。空白组（10只）、骨癌痛模型组（简称模型组,10只）、西药盐酸曲马多对照组（简称西药对照组,10只）、芷辛方高、中、低剂量组（每组各10只）、中药五灵止痛胶囊对照组（简称中药对照组,10只）。造模14天后开始灌胃,芷辛方高、中、低剂量组分别给予芷辛方水煎浓缩制剂（9、4.5、2.25 g/kg生药）。每天灌胃1次,连续7天。第21天取脊髓L4~L5段背角,分别应用免疫组化、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及蛋白质印迹法（Western blot）的方法,分别检验星形胶质细胞的标志性蛋白GFAP的变化,小胶质细胞的标志性蛋白CD11b表达变化以及髓内TLRs（TLR2、TLR4）和NF-κB的影响。结果与空白组比较,模型组大鼠体重增加迟缓甚至呈下降趋势（P〈0.01）;自发性运动疼痛评分（SAPS）明显上升（P〈0.01）;触诱发痛阈值（PWT）明显下降（P〈0.05,P〈0.01）;手术侧胫骨X线影像以及HE染色示：骨结构发生明显改变和破坏。免疫组化检测髓内星形胶质细胞的标记蛋白GFAP明显升高;NF-κB蛋白水平升高（P〈0.01）。与模型组比较,CD11b、TLR2、TLR4及NF-κB水平芷辛方中、高剂量组均明显下降（P〈0.05,P〈0.01）。结论芷辛方可抑制脊髓水平胶质细胞的增殖活化和TLRs（TLR2、TLR4）、NF-κB蛋白的激活,这可能是其镇痛机制之一。
