富血小板血浆预防骨感染的实验研究

《中国修复重建外科杂志》 贾伟涛[1];张长青[1];王坚镪[2];陈佳[2];蒋燕群[2]
摘要:
目的富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)含有高浓度血小板和白细胞,这些细胞成分在机体先天性免疫防御反应中发挥着重要作用,通过评估PRP在体内外的抑菌活性,探讨其作用机制,为临床骨感染的预防和治疗提供实验依据。方法取15例健康成年志愿者外周血35mL,采用两次离心法制备PRP,检测全血、PRP以及离心后的上清液,即贫血小板血浆(platelet-poor plasma,PPP)中血小板和白细胞含量。PRP经凝血酶激活后获得血小板-白细胞凝胶(platelet-leukocyte gel,PLG),将其与终浓度为1×106cfu/mL的金黄色葡萄球菌孵育,分别于2、4、6、8、12、24h取样行菌落计数,并与PRP、PPP及PBS比较。取36只成年雌性新西兰大白兔,体重(2.85±0.11)kg,随机分为4组,PLG组(n=10)、抗生素组(n=10)、感染组(n=10)于兔右后肢胫骨髓腔内注入0.1mL金黄色葡萄球菌悬液(1×106cfu/mL)制备骨髓炎模型,PBS组(n=6)单纯注入PBS代替细菌悬液作为对照。术后PLG组即刻注入1mL PLG;抗生素组于注入细菌悬液前1h静脉注射头孢唑啉至术后72h(30mg/kg),每8小时1次;感染组及PBS组不予处理。术后观察动物一般情况,于28d观察期内通过X线片、组织学和微生物学对骨感染情况进行评估。结果人PRP中血小板及白细胞含量分别达全血的6.2倍和5.5倍,差异有统计学意义(P〈0.05);PPP中血小板及白细胞含量显著低于全血和PRP(P〈0.05)。体外细菌孵育结果显示PLG抑菌作用最明显,细菌数量于孵育4h时降至最低,PRP于6h后达到最低,PPP抑菌作用不显著且缓慢,PBS无抑菌作用。孵育后2、4、6、8、12、24h PLG的细菌减少率均高于PRP和PPP(P〈0.05),PRP高于PPP(P〈0.05)。术后1周PLG组和抗生素组各1只动物因感染死亡,其余34只动物均存活至实验完成。术后28d各组体温、体重、红细胞沉降率及白细胞与术前比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)�
富血小板血浆 , 血小板-白细胞凝胶 , 生物抗菌剂 , 骨髓炎 , 兔
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