摘要:
目的：建立UPLC／Q-TOF-MS法鉴定市售凝血酶冻干粉中的蛋白组分并进行定量。方法：样品经胰蛋白酶消化后的多肽混合物，用超高效液相色谱进行分离，并在线进入ESI—Q—TOF—MS检测，获得的肽段一级母离子和碎片离子的高分辨准确质量数据（MS^E方法），经ProteinLynx Global Server（PLGS2．4）软件蛋白质谱库检索，确定其中的蛋白组分，再以Hi3非标记蛋白定量方法对各蛋白组分进行定量，得到质量百分比定量结果。结果：在以猪血为原料生产的26批凝血酶冻干粉中，鉴定出人血白蛋白和21种猪源蛋白，其中，有1家企业的3批样品中鉴定出猪和人血浆成分，其余23批次样品均为猪血浆成分；样品中的猪凝血酶含量在1．9％～43．7％之间。在以牛血为原料生产的3批凝血酶冻干粉中共鉴定出17种牛源蛋白；样品中的牛凝血酶含量在49．4％～77．6％之间。结论：UPLC／Q-TOF—MS法灵敏度高，选择性好，通过一次分析可对凝血酶冻干粉中蛋白组分同时进行定性和定量，并可获得有关工艺相关的数据信息如来源和种属等，可用于本品的工艺研究以及质量控制研究。该法可以作为同类生化药物质量研究和组分分析的方法。
