摘要:
目的探讨弓形虫感染巨噬细胞过程中花生四烯酸(AA)及前列腺素E2(PGE2)的产生及其相关的细胞内信号调节途径.方法构建刚地弓形虫-小鼠巨噬细胞侵染模型,应用气相色谱、酶联免疫吸附测定(ELISA)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测钙离子调节剂乙二醇双(2-氨基乙醚)四乙酸(EG-TA)、钙离子螯合剂(BAPTA/AM)、钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(TFP)及蛋白激酶C(PKC)抑制剂1-(5-磺酰基)-异喹啉-2-甲基-哌嗪盐酸盐(H7)对弓形虫诱导的AA、PGE2含量及促细胞分裂剂诱导性环加氧酶-2(COX-2)mRNA和蛋白质表达水平的影响.结果EGTA、BAPTA/AM及TFP均可抑制弓形虫诱导的巨噬细胞AA和P GE2合成;PKC抑制剂H7可明显抑制弓形虫和脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞PGE2合成,并伴随着COX-2 mRNA和蛋白质表达呈剂量依赖性减少.结论弓形虫侵染巨噬细胞过程可能通过钙信号转导途径调节COX-2底物AA的含量和PKC依赖的COX-2代谢途径调节PGE2的合成.
