凝乳酶效价测定方法研究

《中国生化药物杂志》 李京;王悦;刘莉莎;任雪;范慧红
摘要:
目的考察凝乳酶效价测定方法的影响因素,改进凝乳酶效价测定方法;考察凝乳酶国家标准品稳定性、适用性。方法考察不同奶粉底物和酶浓度对凝乳酶效价测定的影响;建立3×3量反应平行线法,并对多批样品进行测定,结果与绝对法、单点相对法进行比较;使用绝对法和统计分析对凝乳酶标准品稳定性进行考察;通过量反应平行线法考察凝乳酶标准品的适用性。结果不同奶粉底物对绝对效价的测定有显著性影响;酶浓度与凝乳时间呈幂函数关系;与绝对效价比较,相对效价在不同实验室间结果重现性更好;3×3量反应平行线法测定剂量为0.35、0.44、0.55 U/m L,可信限率小于5%;凝乳酶国家标准品(140712-201302)2015年效价测定结果与2013年结果无统计学意义;在一定剂量范围内,凝乳酶国家标准品与复合凝乳酶或羔羊胃提取物的剂量-反应呈直线关系,2直线平行。结论凝乳酶效价测定影响因素多,通过标准品测定相对效价可以消除不同底物、不同人员操作、终点判断等因素对测定的影响,使实验室之间结果具有可比性;3×3量反应平行线法的实验设计可以更好的控制实验误差;凝乳酶国家标准品(140712-201302)稳定性良好,适用于复合凝乳酶和羔羊胃提取物的凝乳效价测定。
凝乳酶 , 效价 , 复合凝乳酶 , 羔羊胃提取物 , 量反应平行线法
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