摘要:
目的利用大肠杆菌表达系统表达麻疹病毒血凝素（Hemagglutinin,H）基因,并将表达产物应用于麻疹病毒抗体的检测。方法从麻疹病毒株MVi/Zhejiang.CHN/7.05/4中提取核糖核酸,用逆转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）扩增H基因,并克隆到大肠杆菌表达载体pET28a（＋）;用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组质粒在大肠杆菌BL21（DB3）中进行表达;利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis,SDS-PAGE）和蛋白印迹法（Western Blotting）分析重组蛋白表达情况和抗原性：通过Ni-NTA亲和层析获得的高纯度目的蛋白用于酶联免疫吸附试验。结果RT-PCR获得的H基因外段约长1700bp,经测序确证无突变。转化的大肠杆菌表达产物在SDS-PAGE中出现与目的蛋白分子量相一致的条带,且重组蛋白主要以包涵体形式存在;蛋白印迹（Western Blot）显示,表达产物具有良好的抗原性。结论构建麻疹病毒H基因的原核表达体系,纯化的重组蛋白可用作麻疹病毒检测的抗原。
