摘要:
目的目前认为神经细胞凋亡在新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic—ischemic encephalopathy，HIE）的病理过程中起重要作用，细胞色素C（CytC）是重要的促凋亡蛋白因子之一。近年研究发现，肌苷对成年大鼠脑缺血损伤有保护作用，肌苷可降低CytC mRNA的表达从而抑制神经细胞凋亡。本实验通过观察肌苷对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后神经细胞凋亡和细胞色素C基因表达的影响，以初步探讨肌苷对HIBD新生大鼠脑保护作用和可能的机制。方法健康7日龄SD大鼠140只被随机分为3组：正常对照组（n=40），肌苷治疗组（n=50）和HIBD组（n=50），其中肌苷治疗组和HIBD组分别再随机分为缺氧缺血（HI）后6h，12h，1d，3d，7d5个亚组（各亚组n=10）。通过分离、结扎左颈总动脉和8％低氧暴露制备HIBD动物模型。正常对照组不进行缺氧缺血处理，按肌苷治疗组和HIBD组各相同时间点随机分为5个亚组（各亚组n=8）。肌苷治疗组于模型制备后即刻开始腹腔注射肌苷注射液100mg／kg，每天2次，连续7d。以TUNEL法检测神经元凋亡情况，原位杂交技术测定CytC mRNA表达情况。结果正常对照组皮质区和海马区可见少许凋亡细胞和CytC阳性细胞，HI后6h HIBD组皮质区和CA1区凋亡细胞和CytC阳性细胞即见增多，于HI后1d达高峰，之后逐渐下降，HI后7d凋亡细胞和CytC阳性细胞数仍明显高于正常对照组，各时间点与正常对照组相比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。经肌苷治疗后凋亡细胞数和神经细胞CytC mRNA表达均减少，各时间点与HIBD组相应时间点比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。直线相关分析显示HIBD后，凋亡细胞数与CytC mRNA表达呈显著正相关（r=0．88，P〈0.01）。结论HI损伤后给予肌苷干预能减少HI导致的神经细胞凋亡，下调CytC mRNA表达。肌苷治疗后，新生HIBD大鼠的凋亡细胞数减少�
