摘要:
目的：评估银杏蜜环口服溶液对缺氧复氧损伤人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的保护作用;从p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）及内皮型一氧化氮合酶（e NOS）/一氧化氮（NO）信号途径探讨银杏蜜环口服溶液保护受损HUVECs的药效机制。方法：缺氧缺糖/复氧复糖法建立体外HUVECs缺血再灌注损伤模型。分为正常组、模型组、银杏蜜环口服溶液高质量浓度组（75 mg·L^-1,简称银蜜高）,低质量浓度组（36 mg·L^-1,简称银蜜低）,p38 MAPK抑制剂SB203580组,银蜜高＋SB203580组,e NOS抑制剂亚硝基左旋精氨酸甲酯（L-NAME）组,银蜜高＋L-NAME组。细胞增殖-毒性检测试剂盒（CCK-8）及微量酶标法检测细胞活力及细胞损伤;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化p38 MAPK（p-p38 MAPK）/p38 MAPK和磷酸化e NOS（p-e NOS）/e NOS蛋白表达;酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,可溶性细胞间黏附分子-1（s ICAM-1）,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）含量;硝酸盐还原酶法检测NO含量。结果：银蜜高、银蜜低组可显著提高缺氧复氧损伤HUVECs活力、降低细胞乳酸脱氢酶（LDH）漏出量（P〈0.05,P〈0.01）;抑制受损细胞p38的磷酸化（P〈0.05）,降低细胞培养上清中TNF-α,s ICAM-1含量（P〈0.05,P〈0.01）。在给予银蜜高或（和）SB203580后,受抑制的e NOS磷酸化表达水平显著升高（P〈0.05）;银蜜高可显著提高受损细胞NO含量,在加入e NOS抑制剂L-NAME后,银蜜高可拮抗L-NAME降低细胞NO生成和升高Caspase-3的作用（P〈0.05）。结论：银杏蜜环口服溶液可提高氧复氧损伤HUVEs活力,具有抗炎、调节内皮系统、抑制细胞凋亡的作用,机制与其作用于p38 MAPK进而调节e NOS-NO信号途径相关。
