摘要:
目的构建钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL41基因的重组原核表达质粒,为进一步制备以LipL41为目的基因的亚单位疫苗提供实验依据.方法根据钩端螺旋体L.kirscneri RM52株外膜脂蛋白LipL41基因序列设计引物,以赖型钩端螺旋体017株基因组DNA为模板,进行PCR扩增并DNA测序,以质粒pGEX1λT为载体,插入LipL41基因片段构建重组原核表达质粒,并检测LipL41的表达. 结果测序结果示所得片段为LipL41的编码序列,酶切及PCR分析证实重组质粒构建成功,SDS-PAGE和Western blotting分析重组质粒可高效表达蛋白质LipL41. 结论 LipL41基因的重组原核表达质粒构建成功,并可在大肠杆菌中高效表达.
