靶向ST6GalⅠ的siRNA与反义寡核苷酸联合应用对结肠癌细胞转移能力的影响

《南方医科大学学报》 苑天红[1];李明远[1];李婉宜[1];李虹[1];蒋忠华[1]
摘要:
目的探讨人α2,6-唾液酸转移酶(ST6Gal Ⅰ)小分子干扰RNA(siRNA)及其与相同或不同靶点的反义寡核苷酸(ASO)联合应用,对ST60al Ⅰ高表达的结肠癌SW480细胞的粘附和侵袭力的影响。方法设计并合成靶向ST6Gal Ⅰ的siRNA及ASO,用脂质体Lipofectamine2000包裹后转染SW480细胞。实验分为空白对照组、脂质体对照组、siRNA组、ASO1组(与siRNA不同靶点)、ASO2组(与siRNA相同靶点)、siRNA+ASO1组及siRNA+ASO2组,应用RT—PCR测定细胞中ST6Gal ⅠmRNA水平,流式细胞术检测细胞表面α2,6-唾液酸含量,分别用CytoMatrix^TM细胞粘附试剂盒及细胞侵袭分析试剂盒,检测细胞对细胞外基质的粘附与侵袭力。结果siRNA组、ASO1组、ASO2组、siRNA+ASO1组、siRNA+ASO2组中。SW480细胞的ST6GalⅠmRNA表达水平、细胞表面α2,6-唾液酸含量及细胞对ECM的粘附与侵袭力均明显低于空白对照组、脂质体对照组(P〈0.05),以siRNA+ASO1组最明显,且siRNA+ASO1组与siRNA组比较,差异有统计学意义(P〈0.05),而siRNA+ASO2组与siRNA组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论化学合成的靶向ST6GalⅠ的siRNA能够下调SW480细胞中ST6GalⅠ基因的表达,继而降低细胞对ECM的粘附和侵袭力,并且与不同靶点的ASO联合应用具有相加和协同效应。
RNA , 小分子干扰 , 反义寡核苷酸 , 唾液酸转移酶 , 结肠肿瘤
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