摘要:
目的研制一种用于产前筛查孕母血清游离β绒毛膜促性腺激素（freehCGβ）的时间分辨荧光免疫（TRFIA）试剂盒。方法采用2株freehCG13单克隆抗体（McAb），一株用于固相包被（3μg／ml），另一株用于标记铕（Eu3＋）制备Eu3＋-freehCG13MeAb，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，应用双抗体夹心法建立freehCGBTRFIA法，并对其进行性能评价。采用线性回归分析及配对t检验进行统计学分析。结果该试剂盒的剂量一反应曲线线性相关系数（r）达0．9990；分析内、分析间变异系数（CV）均小于10．00％；标准品各点实测值与标示值的偏差（DIFF）均小于5．00％；灵敏度不高于0．20ng／ml；以国家标准品为对照，标准品效价比在0．9130～1．100间；与人促甲状腺激素（hTSH）、人黄体生成素（hLH）、人卵泡刺激素（hFSH）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）交叉反应低；线性范围为2．00—200ng／ml；与同类国外试剂比对，线性回归方程为y=x＋0．0565，r=0．9771，检测结果间差异无统计学意义（t=0．1839，P〉0．05）；国内外同类仪器比对检测，线性回归方程为y=0．9894x＋0．0957，r=0．9995，检测结果间差异无统计学意义（t=-0．9669，P〉0．05）；室间质量评价实测值与靶值偏倚（-11．93％～7．01％）符合标准；干扰实验表明乙二胺四乙酸钾（EDTA．K2）≥0．54mmol／L、柠檬酸钠≥1．06mmol／L、草酸钾（K2C204H20）≥2．12mmol／L、氟化钠（NaF）≥29．76mmo]／L时，自制试剂盒检测结果明显偏低（干扰程度均〉10％），肝素≤150U／L、血红蛋白≤12g／L、三酰甘油≤21．54mmol／L和胆红素≤818txmol／L对该试剂盒检测结果无明显干扰（干扰程度均〈10％）；温度升高会使样本检测结果偏高。结论该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、准确度好、线性范围宽等优点，与国外的同类产品性能相仿，�
