摘要:
以乙脑弱毒SA14-14-2作为母种,采用原代地鼠肾细胞和乳鼠皮下传代方法并结合蚀斑纯化技术,选育获得乙脑减毒活疫苗猪用毒株SA14-14-2VS株.该毒株经细胞传到15～18代,脑内接种12～14 g小鼠不引起发病和死亡;皮下接种10～12 g小鼠,从脑组织中不能分离出病毒;经3～5日龄乳鼠回传一代后,脑内毒力Log LD50仅为1. 32～2.10,皮下接种小鼠无致病力.该毒株细胞18代毒,用乳猪传至第五代,从乳猪血液、脑、肝组织中分离的病毒再经细胞传二代,其滴度与原毒液相近,并仍对小鼠脑内感染不致死;8头小公猪经该毒接种后,未发生睾丸炎,睾丸组织中未回收到病毒;经静脉接种的2头怀孕30 d的初产母猪,虽接种后2 d和4 d血样中检出病毒,但接种21 d剖杀时,胎儿均健活,胎盘、羊水及胎儿脑组织中均未回收到病毒,该毒株能使豚鼠和猪产生较强的免疫应答,对小白鼠攻击的保护力比灭活疫苗高;纯毒检定及外源因子污染检定结果表明,该毒株是纯净的乙脑病毒,符合兽用生物制品种毒标准.
