摘要:
目的采用基因工程技术使bFGF在大肠杆菌中得以高效表达,为进一步研究其生物学活性和临床应用价值奠定基础。方法将人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)基因定向插入原核表达载体pET-28c,获得重组表达质粒pETcF。将pETcF转化宿主菌BL21(DE3)pLysS,以IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳分析表明目的蛋白在宿主菌内成功表达,该蛋白表达量随诱导时向的延长而逐渐增加,3h达到最大值。结果凝胶薄层扫描结果显示,该蛋白表达量占菌体总蛋白的37.4%。Westernblotting检验,该蛋白可与bFGF抗体发生特异结合。结论为进一步研究bFGF的生物学活性和临床应用价值打下基础。