摘要:
目的:纯化牛初乳免疫球蛋白A(IgA)并在原子力显微镜(AFM)下进行观测。方法:应用逐级盐析、透析和离子交换层析等生化手段,从牛初乳中提取IgA,SDS-PAGE鉴定纯化结果。应用AFM对吸附在新剥离云母或多聚赖氧酸(PLL)处理云母片基上的IgA进行空气相的结构观测。结果:考马斯亮蓝染色鉴定纯化的蛋白含有重链、轻链和分泌片;正常生理条件下的IgA以寡聚体结构为主,单体大约2.6nm×18.0nm×20.2nm,与电镜结果基本吻合;IgA在PLL处理云母片基上的吸附呈现树枝状聚集,随孵育时间的延长,聚集现象更趋明显。结论:结合生化方法和AFM观测,可对IgA等免疫球蛋白分子进行天然结构状态的微观探测,为研究其生理调控功能的结构基础提供有效的研究途径。