蜘蛛拖丝蛋白基因的构建及在大肠杆菌中的表达

《生物工程学报》 李敏;章文贤;黄智华;黄建坤
摘要:
蜘蛛大壶腹线产生的拖丝是非常优良的纤维蛋白,具有独特的强度和弹性.基于拖丝蛋白高度重复序列和部分cDNA序列,合成蜘蛛拖丝蛋白基因单体,通过头尾相连的构建策略,得到拖丝蛋白多聚体,与原核高效表达载体pET30a(+)连接,转化大肠杆菌BLR(DE3),用IPTG诱导表达.表达产物经His.Bind树脂金属螯合亲和层析一步纯化,纯度达90%以上,表达量为20mg/L.SDS-PAGE和蛋白质印迹图谱显示表达产物分子量为37kD,其值与氨基酸组分分析结果与理论推算值基本符合.
蜘蛛 , 拖丝蛋白基因 , 大肠杆菌 , 表达
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