摘要:
背景：传统诱导剂只具有单纯诱导成骨或成脂的分化作用,应用较为局限。杜仲叶提取物具有提高骨密度、抑制骨吸收、调节骨代谢功能的药效作用,可促进成骨细胞增殖和碱性磷酸酶分泌。目的：探讨杜仲叶提取物诱导羊骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的同时,是否具有抑制成脂肪分化的作用。设计、时间及地点：细胞学体外观察,于2008-02/10在南昌大学第二附属医院分子中心实验室完成。材料：健康12月龄羊6只,由南昌大学提供。杜仲叶提取物由江西师大生物技术公司制备。方法：采用全骨髓法体外分离培养羊骨髓间充质干细胞,取第3代细胞,设立6组：空白对照组,加入DMEM＋胎牛血清;传统成骨诱导剂组,加入含地塞米松、β-甘油磷酸钠、抗坏血酸的DMEM高糖培养基;传统成骨诱导剂＋杜仲叶提取物组,在传统诱导剂组基础上加入10^-5g/mL杜仲叶提取物;10^-4,10^-5,10^-6g/mL杜仲叶提取物组分别加入对应质量浓度的杜仲叶提取物。同时另取第3代细胞行成脂肪诱导,分组同上,仅将传统成骨诱导剂更换为传统成脂诱导剂。主要观察指标：成骨诱导后,钙钴法检测碱性磷酸酶活性,VonKossa法观察矿化结节的形成,RT-PCR法检测成骨细胞中Cbfa1mRNA基因的表达;成脂诱导后,油红O染色观察骨髓间充质干细胞成脂分化情况。结果：与空白对照组比较,各成骨诱导组细胞内碱性磷酸酶合成增多,形成矿化结节,且传统成骨诱导剂＋杜仲叶提取物组、10^-4,10^-5g/mL杜仲叶提取物组诱导成骨情况优于传统成骨诱导剂组、10^-6g/mL杜仲叶提取物组;RT-PCR显示各成骨诱导组均能高效扩增出171bp的Cbfa1基因转录片段,且成骨细胞中Cbfa1mRNA表达水平差异无显著性意义（P〉0.05）。油红O染色结果显示,加入杜仲叶提取物的各成脂诱导组,其脂滴数量明显少于传统成脂诱导剂组。结论：杜仲叶提取物能�
