摘要:
由双拷贝CaMV35S启动子驱动担子菌灰树花(Grifola frondosa)的海藻糖合酶基因(TSase)构建植物表达载体pBBBT,通过三亲交配法将pBBBT导入根癌农杆菌EHA105菌株,经根癌农杆菌介导转化甘蔗(Saccharum hvbrid)栽培品种,以增强甘蔗的抗旱能力.结果表明,甘蔗胚性愈伤组织对EHA105菌株敏感,甘蔗外植体开始大量形成胚性愈伤组织时是感染的适宜时期,用膦丝菌素(PPT)筛选,抗性植株发生频率平均为4.5%.经PCR及dot-Southern检测证明,TSase已经整合到甘蔗基因组中.部分转化植株根叶畸形、株型异常、生长缓慢.移栽到含PEG8000 17.4%(w/v)的MS培养基后,观察到转基因植株抗渗透胁迫能力增强.