摘要:
目的建立用于遗传转化的青羊参组织培养系统。方法以不同外植体部位、不同消毒剂、不同消毒时间建立无菌苗；以不同外植体部位、不同激素种类及配比、不同质量浓度的2，4-D与KT诱导青羊参愈伤组织形成、继代、分化；测定青羊参对标记基因分解物庆大霉素（Gent．）的敏感性。结果以青羊参的种子及茎段做外植体，以10％次氯酸钠消毒种子20～30min，或以0．2％HgCl2消毒茎段3min建立无菌苗具有最好效果；青羊参的种子、根、茎、叶易于形成愈伤组织；2，4-D对青羊参愈伤组织的形成是必要的；青羊参对KT较为敏感，不论用KT诱导青羊参愈伤组织的形成，还是诱导胚芽或腋芽形成，均有较好效果；以MS为基本培养基，以2，4-D1．0mg／L＋KT1．0mg／L为激素配比诱导青羊参愈伤组织的形成具有较好效果；以MS＋2，4-D0．5mg／L＋KT0．5mg／L继代愈伤组织具有较好效果；以MS＋KT0．5mg／L＋NAA0．1mg／L诱导种子的胚芽或茎段的腋芽萌发具有较好效果；青羊参的愈伤组织不论来源于种子，还是来源于根、茎、叶，不论使用激素6-BA，还是使用KT、ZT、2ip均未观察到愈伤组织分化形成不定芽；100μg／mL的庆大霉素是青羊参转基因植株筛选的最佳压力。结论通过基因枪介导转基因时，选择种子或茎段在MS＋2，4-D1．0mg／L＋KT1．0mg／L培养基上萌动14d，形成愈伤但未形成芽的材料作为基因枪轰击材料较好。
