摘要:
目的探讨马兜铃酸(AA)对人类肾小管上皮细胞(HKC)转分化和凋亡的影响.方法将不同浓度的AA(5、10、20和40 mg/L)分别加入HKC细胞培养液中培养48 h,应用下列方法观察HKC细胞转分化:间接免疫荧光法检测HKC细胞角蛋白和波形蛋白的表达,免疫组化双染色技术测定HKC细胞E-钙黏连蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,流式细胞技术测定HKC细胞表达α-SMA阳性百分率;应用Giemsa染色、TUNEL反应和琼脂糖凝胶电泳观察HKC细胞凋亡,流式细胞技术测定HKC细胞凋亡的百分率.结果 10 mg/L的AA作用于HKC细胞48 h后角蛋白、E-钙黏连蛋白表达减弱,波形蛋白表达增强,HKC细胞表达α-SMA阳性率(14.17±0.61)%比无血清对照组的(3.57±0.52)%显著增高.40 mg/L的AA作用HKC细胞48 h后细胞凋亡(53.4%)比无血清对照组(2%)显著增高.5和20 mg/L的AA未能引起HKC明显凋亡或转分化.结论较低浓度(10 mg/L)的AA对HKC细胞有轻度的促转分化作用,较高浓度(40 mg/L)的AA作用48 h后引起多数HKC细胞凋亡,AA的上述作用可能与马兜铃酸肾病的发病机制有关.
