抗冻基因CBF_2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究

《草业学报》 刘晓静[1,2];郝凤[1,2];张德罡[1,2];毛娟[3];于铁峰[1,2]
摘要:
本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中。通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织。
抗冻基因CBF2 , 载体构建 , 农杆菌 , 紫花苜蓿 , 转化
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