摘要:
通过携带有mariner转座子的质粒pJZ290随机插入诱变中华根瘤菌（Sinorhizobium meliloti）建立突变子文库,并从中筛选到自体诱导物（autoinducer,AI）部分缺失突变株YW1。Arbitrary PCR扩增、DNA测序得到YW1基因组DNA中mariner转座子两端侧翼序列,经DNA序列拼接在GenBank上进行同源性分析后获得一个621bp的完整的开放阅读框（ORF）,该ORF编码的酶具有206个氨基酸,与草木樨中华根瘤菌（Sinorhizobium medicae）WSM419的LuxI类自体诱导物合成酶（autoinducer synthase）TraI的同源性高达99%。因此,也将该基因命名为traⅠ。将该基因克隆到广宿主范围表达载体pYC12并在大肠杆菌Escherichia coli DH5α中成功表达,C18反相薄层层析（TLC）在阳性重组子培养上清中检测到四种自体诱导物分子,其中的两种正是AI缺失突变株YW1所缺失的AI,这些结果表明该traⅠ基因在苜蓿中华根瘤菌负责合成两种自体诱导物分子,为进一步研究其群体感应系统奠定了理论基础。
