摘要:
根据已发表的序列,通过PCR技术克隆了一系列构建烟草叶绿体多顺反子表达载体所需的元件:质体核糖体(16S)RNA操纵元启动子(Prrn)、质体psb A基因3'端(psb A3')、山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)、烟草叶绿体高频同源重组片段(psaA/psbC,大小3463bp)、甘露聚糖酶基因(man)、绿荧光蛋白基因(gfp).构建了烟草质体多顺反子定点整合表达载体pLM7(-psaA-Prrn-SD-man-SD-gfp-SD-BADH-psb A3'-psbC-).并在大肠杆菌中通过平板定性分析等方法对所构建载体上的表达盒进行了功能鉴定.