摘要:
目的：制备抗侵染浙贝母的浙贝母病毒Y（Fritillary virus Y,FVY）CP血清,为大田检测FVY和研究FVY与其他病毒之间的血清学关系奠定基础。方法：根据Genbank报道的FVY CP基因序列设计引物,扩增其CP基因。Blast分析FVY CP基因核苷酸序列与其他马铃薯Y病毒属成员CP基因的同源性。将CP基因插入表达载体pSBET,转化大肠杆菌BL21（DE3）Plys E菌株,通过IPTG诱导表达。经12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE两次纯化CP,免疫小鼠获得抗CP血清,采用Western blot分析抗体的特异性。用原核表达的17种马铃薯Y病毒属病毒CP蛋白作为抗原,检测抗FVY CP血清是否能与其进行交叉反应。采用ELISA分析抗体能否与天然FVY病毒离子结合。结果：FVY CP基因与油点草病毒Y（TrVY）CP基因、大豆花叶病毒半夏分离物CP基因和小西葫芦黄花叶病毒六安分离物CP基因分别有81.2%、68.1%和67.2%的同源性。制备的抗体对FVY CP具有高度特异性,同时能与大豆花叶病毒半夏分离物（SMV-P）CP蛋白有中等强度的结合,与小西葫芦黄花叶病毒CP蛋白有弱的结合。结论：抗体能够与天然FVY病毒离子结合,因此可以作为该病毒的大田检测。
