小皱蝽抗菌物质的诱导及抗菌肽AMP-2的分离纯化和特性

《应用与环境生物学报》 杨泽宏[1];杨星勇[2];罗克明[2];董玉梅[2]
摘要:
针刺小皱蝽成虫腹部,诱导免疫防御反应,小皱蝽成虫组织经过浸提、浸提液TFA酸化、超速离心、超滤、固相萃取等分离步骤,平板生长抑制试验检测抗菌活性.在C18 Sep—Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脱组分为初样品,经RP—HPLC、GPC—HPLC及填料孔径更小的反相色谱柱纯化,得到0.452mg AMP-2样品.琼脂孔扩散法检测AMP-2抗菌活性,回收率为4.04%.抗菌肽AMP-2在Superdex Peptide凝胶过滤柱上测得分子量(Mr)为3.2×10^3,茚三酮反应紫色.AMP-2具有一定热稳定性,在pH3~8的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强,对检测的动植物病原菌具有广谱抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌D22、枯草芽孢杆菌的MIC值为2.5gg/mL,对四联球菌的MIC值为5.0gg/mL,AMP-2可能为富含脯氨酸的小分子抗菌肽.图3表2参11
小皱蝽 , 抗菌肽 , 诱导 , 分离纯化
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