摘要:
针刺小皱蝽成虫腹部,诱导免疫防御反应,小皱蝽成虫组织经过浸提、浸提液TFA酸化、超速离心、超滤、固相萃取等分离步骤,平板生长抑制试验检测抗菌活性.在C18 Sep—Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脱组分为初样品,经RP—HPLC、GPC—HPLC及填料孔径更小的反相色谱柱纯化,得到0.452mg AMP-2样品.琼脂孔扩散法检测AMP-2抗菌活性,回收率为4.04%.抗菌肽AMP-2在Superdex Peptide凝胶过滤柱上测得分子量(Mr)为3.2×10^3,茚三酮反应紫色.AMP-2具有一定热稳定性,在pH3~8的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强,对检测的动植物病原菌具有广谱抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌D22、枯草芽孢杆菌的MIC值为2.5gg/mL,对四联球菌的MIC值为5.0gg/mL,AMP-2可能为富含脯氨酸的小分子抗菌肽.图3表2参11