摘要:
以芝麻菜Erucasativa Mill无菌苗下胚轴为材料，研究了光照条件、苗龄、酶液组合、酶解时间、酶液中甘露醇浓度及纯化条件对其原生质体分离制备的影响．以附加不同激素组合的改良KM8p培养基进行液体浅层培养．结果表明，无菌苗的下胚轴酶解10h，用“过滤-离心-漂浮法”进行纯化后，可高效分离出有活力的原生质体；在改良的KM8p培养基的进行原生质体培养，当密度为7×10^4mL^-1时，分裂频率最高，为24．8％．4周后形成大量的细胞团和肉眼可见的小愈伤组织，植板率为5．6％．然后转移到培养基上使其增殖，当愈伤组织长至3～5mm时，将其转到分化培养基上诱导芽的分化，芽分化率为33．6％．当芽长2～3cm时，将其切下插入生根培养基上诱导生根，可获得完整植株．
