摘要:
目的观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用，并探讨其可能的作用机制。方法利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304，采用H2O2诱导细胞损伤模型，观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用。MTT法检测细胞存活率、试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及细胞中丙二醛（MDA）的含量、乳酸脱氢酶（LDH）的漏出量；荧光法检测Caspase-3的活性；Hoechst33342及PI荧光染色法观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响；JC-1染色法检测红车轴草总黄酮对H2O2损伤血管内皮细胞线粒体膜电位的影响，检测各组细胞内ROS的表达水平。结果与空白对照组相比，H2O2损伤组细胞存活率降低、细胞内LDH，漏出量增加（P〈0．001）；抗氧化酶SOD、CAT、GSH—Px活性降低、MDA含量升高（P〈0．01）；Caspase-3活性升高（P〈0．001）、ROS含量升高、线粒体膜电位降低；与模型组相比，红车轴草总黄酮各剂量组（12．5、25、50mg·L^-1）及槲皮素组（30mg·L^-1）细胞存活率明显增加（P〈0．01，P〈0．05），红车轴草总黄酮各剂量组（12．5、25、50mg·L^-1）及槲皮素组（30mg·L^-1）均能明显降低LDH漏出量（P〈0．01，P〈0．05）、明显增强SOD、CAT及GSH—Px活力（P〈0．01，P〈0．05）、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性（P〈0．05，P〈0．01）、升高线粒体膜电位（P〈0．01）。结论红车轴草总黄酮对H2O诱导的内皮细胞损伤有明显的保护作用，其初步作用机制可能与抗自由基，减轻脂质过氧化、降低Caspase-3活性及稳定线粒体膜电位有关。
