摘要:
以长白山区的5种杓兰属植物大花杓兰、杓兰、东北杓兰、山西杓兰、斑花杓兰为试材,对影响PCR扩增效果的模板浓度、引物浓度、dNTP浓度、Taq酶量以及退火温度进行了优化,以期建立杓兰属植物ISSR-PCR的反应体系。结果表明:25μL反应体系中DNA模板的量为30.00ng、引物0.60μmol/L、dNTP0.20mmol/L、Taq酶0.75U;该体系以5种杓兰属植物,4个引物进行扩增验证,能够得到清晰的条带,且具有多态性,而且有可重复性;表明建立的杓兰属ISSR_PCR体系适用遗传多样性的研究。