摘要:
【目的】紫杉醇是重要的抗癌药物，主要从罗汉松等植物中提取，为了保护罗汉松等种质资源，本文从罗汉松植株中分离产紫杉醇内生真菌，并对内生真菌所产紫杉醇的抗肿瘤活性进行了分析。【方法】采用组织块法自罗汉松的根、茎、叶等组织中分离内生真菌；通过四唑蓝（Methyl Thiazolyl Tetrazolium，MTT）比色法筛选有抗肿瘤活性的内生真菌菌株，通过薄层层析（Thin Layer Chromatography，TLC）和高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）对内生真菌所产活性物质进行鉴定；采用抽提法抽提内生真菌所产紫杉醇，应用Vero细胞对抽提的紫杉醇的活性进行了分析。【结果】从罗汉松属（Podocrapus）植物中分离到155株内生真菌，其中28株内生真菌具有较高的抑癌活性。将其中一株菌株A2命名为EPTP-1，经形态学和分子分类学分析鉴定为烟曲霉（Aspergillus fumigatuso菌株EPTP-1中抽提的紫杉醇5．553μg／L～555．3μg／L作用24h表现出明显的致细胞凋亡作用。菌株EPTP-1发酵5天时紫杉醇的产率为0．5578±0．0294mg／L。【结论】从罗汉松中分离到了一株产紫杉醇内生真菌EPTP-1，可作为紫杉醇类药物工业化生产的候选菌株。
