摘要:
半胱氨酸合成酶是植物半胱氨酸合成反应的关键限速酶。文中应用RACE技术从西伯利亚蓼中成功克隆了半胱氨酸合成酶基因（GenBank登录号：EU597481），命名为PcCSasel，该基因全长cDNA为1260bp，编码382个氨基酸。经生物信息学分析，初步确定PcCSasel的N端前16个氨基酸为信号肽，并引导PcCSasel蛋白定位于胞质，为胞质型半胱氨酸合成酶。同源序列分析表明，此蛋白与其他植物半胱氨酸合成酶成熟蛋白序列高度保守，氨基酸相似性达到90％左右。荧光定量RT-PCR分析表明，PcCSasel在西伯利亚蓼的叶、茎和地下茎中均有表达，叶中表达最高，茎和地下茎次之，在3％NaHCO3胁迫过程中，该基因在叶、茎和地下茎中均在第2d表达量最高。将PcCSasel转入酿酒酵母INVScl，结果显示培养基中半胱氨酸和菌体中谷胱甘肽含量均有显著增加，在10％NaHC03和5mol／LNaCl胁迫下，转基因INVScl-pYES2-PcCSasel菌株的存活率明显高于对照INVScl-pYES2，证明PcCSasel基因具有耐高盐的作用。
