摘要:
为建立同时检测基因A型和C型鸭甲肝病毒（DHAV－A，DHAV－C）的双重RT－PCR方法，本实验根据GenBank中DHAV－A和DHAV－C全基因组序列，针对DHAV－A的3C、3D和DHAV－C的2C区域分别设计了2对引物，通过对反应体系和反应条件的优化及特异性、灵敏度评价，建立了检测DHAV-A和DHAV-C的双重RT-PCR方法。该方法能够分别从DHAV-A、DHAV-C阳性样本中扩增出DHAV-A（259bp）和DHAV-C（194bp）的拷贝／μL、1．68×10^4拷贝／μL；对2009年8月至2011年7月送检病料检出DHAV-A和DHAV-C的阳性率分刖为20％（14／70）、70％（49／70）；随机抽取的DHAV-CPCR阳性样本的病毒分离结果与双重RT-PCR检测结果的符合率为100％（16／16）。本研究结果显示，建立的双重RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性，可用于临床DHAV的快速鉴别诊断。
