摘要:
目的建立大鼠隐性脊柱裂和显性脊柱裂畸形动物模型,观察丙戊酸钠和维甲酸诱导大鼠脊柱裂畸形的特点,初步探讨脊柱裂畸形的发生机制.方法雌性Wistar孕鼠随机分成组:对照组,实验组分成丙戊酸钠三个不同剂量组和维甲酸组.对照组孕鼠不予任何处置,20 d胎鼠脊柱染色标本采集图像经计算机软件显微图像分析,测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离,目的确定软骨端距离参考值.雌性Wistar大鼠,在确定怀孕的第9 d 9:00、16:00,按体重计算剂量后于后肢皮下注射20%丙戊酸钠溶液.妊娠第20d剖宫,检查胚胎外观,判定是否有外观可见畸形,然后取脊柱进行骨和软骨双重染色,染色后标本采集图像测量出每个椎体椎弓两个软骨端距离.参照正常胎鼠确定的参考值判定隐性脊柱裂.Wistar大鼠确定怀孕的第10 d 9:00,胃管灌入维甲酸矿物油混悬液135 mg/kg(40 mg/ml),妊娠第20 d剖宫,检查胚胎外观判定显性脊柱裂畸形发生情况并记录.结果丙戊酸钠诱导隐性脊柱裂畸形随药物剂量加大,畸形发生率升高,丙戊酸钠剂量400 mg/kg、450 mg/kg、500 mg/kg诱导畸形发生率分别是80%、93%、100%,腰椎对丙戊酸钠的致畸作用最敏感;丙戊酸钠还可以导致头端神经管畸形,未观察到显性脊柱裂的发生.维甲酸135 mg/kg诱导胎鼠显性脊柱裂的发生率52.3%,畸形都发生在腰骶段,其他畸形的总发生率高达90.7%.结论丙戊酸钠抑制软骨细胞增生,影响椎体的软骨发生使椎弓不能闭合导致胎鼠隐性脊柱裂的发生.腰椎对丙戊酸钠的致畸作用最敏感,隐性脊柱裂多发生在腰骶段.过量的维甲酸直接影响神经上皮细胞、神经嵴细胞、原基器官间质细胞的生化过程和尾端未分阶段的中胚层,导致胚胎尾端发育不良综合症复杂畸形出现.丙戊酸钠和维甲酸通过不同机制导致畸形的发生.
