摘要:
目的建立适用甲3型流行性感冒（流感）病毒核酸检测的环介导逆转录等温扩增（RT-LAMP）方法，为基层实验室流感快速诊断服务。方法对甲3型流感病毒设计两对环介导特异性引物与一个环引物，采用环介导RT-LAMP技术对甲3型流感病毒核酸进行等温扩增，并对反应体系进行优化。结果采用RT-LAMP技术检测甲3型流感病毒核酸，敏感度可达0．01TCID50／反应，与荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的敏感度相一致，且对H1和H5亚型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、麻疹病毒、风疹病毒、流行性腮腺炎病毒、副流感病毒与腺病毒无交叉反应，具有良好的特异性。采用该方法检测58份临床样本，病毒分离的阳性率为37．9％，而荧光定量RT-PCR与RT-LAMP的阳性率分别为53．45％和51．72％，敏感度明显高于通常的细胞病毒分离。结论甲3型流感病毒环介导RT-LAMP检测方法，不仅快速特异、敏感性强，而且简便价廉，适于基层实验室使用。
