摘要:
目的从人脑胶质母细胞瘤中分离培养脑肿瘤干细胞（brain tumorstem cells，BTSC），并研究其生物学特性。方法利用无血清培养基和悬浮培养方法，从6例人胶质母细胞瘤标本中分离培养BTSC，并通过单克隆形成实验观察脑肿瘤干细胞球（brain tumor sphere，BTS）的形成过程。将BTSC接种于含血清培养基，观察其在体外的分化特点。将BTSC子代分化细胞更换培养条件，观察其在无血清培养基中的逆向分化现象。应用细胞免疫荧光染色对BTSC及其分化细胞进行鉴定。结果在人胶质母细胞瘤中成功分离出BTSC，其在无血清培养基中呈悬浮球状生长，具有很强的自我更新和增殖能力；免疫荧光显示其表达CD133。BTSC在含血清培养基中发生贴壁分化。分化后的子代细胞可表达CD133、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。BTSC子代分化细胞在无血清条件下培养，能够再次增殖形成BTS，呈逆向分化现象。结论人胶质母细胞瘤中存在BTSC，其具有自我更新、无限增殖、多向分化以及逆向分化等生物学特性。
