摘要:
目的：研究建立鹿角胶中L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸4个氨基酸的分析和测定方法。方法：样品以6 mol·L-1盐酸于沸水浴水解1 h,蒸干,甲醇溶解,以苯酚-0.5%硼砂溶液（4∶1）为展开剂,硅胶G为固定相,茚三酮试液为显色剂进行TLC分析。样品以6 mol·L-1盐酸于150℃水解1 h,以异硫氰酸苯酯（PITC）为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析。采用Phenomenex C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温为43℃;流动相A为乙腈-0.1 mol·L-1醋酸钠（7∶93）,流动相B为乙腈-水（4∶1）,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1;检测波长为254 nm进行HPLC测定分析。结果：TLC能较好地鉴别出鹿角胶中的L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸。HPLC测定L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的线性范围分别为0.02～0.34μg（r=1.000）,0.04～0.71μg（r=1.000）,0.02～0.30μg（r=0.9998）,0.02～0.37μg（r=1.000）;加样回收率（n=6）分别为99.5%（RSD=2.3%）,97.8%（RSD=1.6%）,100.8%（RSD=1.6%）,97.9%（RSD=2.4%）。结论：该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于鹿角胶中L-羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、L-脯氨酸的检测。
