摘要:
合成19-去甲睾酮(19-NT)人工抗原,并进行免疫学特性鉴定。丁二酸酐法衍生化19-NT,制备17β-19-NT琥珀酸酯半抗原,其质谱和核磁共振NMR谱表明合成成功。分别用EDC法和混合酸酐法将半抗原与BSA(bovine serum albumin)和OVA(ovalbumin)偶联,制备免疫和检测抗原,并进行紫外扫描和红外光谱鉴定,NT与BSA偶联比为18:1。用NT-BSA免疫Balb/C小鼠(Mus muscalus)制备NT多克隆抗体,间接ELISA效价达到1:25600。间接竞争ELISA的IC50为27.3ng/mL,线性检测范围为3.3~225.0ng/mL,最低检测限为1.6ng/mL。纯化后的抗体与17α-去甲睾酮的交叉反应率为69%,与其它激素的交叉反应率均〈0.05%。制备的抗体灵敏度高、特异性强,为试剂盒和试纸条的研制提供基础资料。