摘要:
目的：研究中药片仔癀对骨肉瘤U-20S细胞的诱导凋亡作用。方法：①采用1月龄SD大鼠16只，雌雄各半，体重120g左右，随机分为2组（空白血清组和片仔癀治疗组），每组8只。空白血清组大鼠灌服PBS，片仔癀治疗组大鼠灌服中药片仔癀溶液。②人骨肉瘤U-20S细胞培养于合10％胎牛血清，青霉素100IU／ml，链霉素100μg／ml的RPMI1640培养液中，置于37℃、5％C02饱和湿度的细胞培养箱中培养。用MTT法检测不同含药血清浓度对骨肉瘤U-20S细胞增殖的影响，筛选对骨肉瘤U-20S细胞作用最佳的片仔癀舍药血清浓度。③在倒置相差显微镜和电镜下观察骨肉瘤U-20S细胞形态。④TUNEL原位末端标记法检测细胞的凋亡。⑤提取基因DNA，琼脂糖凝胶电泳，以DNA琼脂糖凝胶电泳和透射电镜检测细胞凋亡。结果：①20％片仔癀含药血清对骨肉瘤细胞的增殖抑制作用最佳。②倒置相差显微镜观察可见空白血清组细胞呈梭形贴壁生长，在20％片仔癀胶囊含药血清组，可见部分细胞体积变小、变圆，细胞膜完整但出现发泡现象，折光性增强。随作用时间延长，变圆细胞逐渐增多，部分贴壁细胞皱缩、变圆、脱落，可见坏死细胞及碎片。③20％片仔癀胶囊含药血清组TUNEL检测阳性。④DNA Ladder电泳结果：含药血清组细胞基因DNA凝胶电泳出现明显的梯状带。⑤透射电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚，细胞表面出现凋亡小体。结论：中药片仔癀胶囊对骨肉瘤U-20S细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用。
