摘要:
目的:观察保存人羊膜对体外培养及移植状态下人血管内皮细胞生长状况的影响,研究羊膜移植治疗角膜新生血管性疾病的机制.方法:取健康产妇胎盘羊膜,以酶消化加机械分离法去上皮,-80℃甘油保存.使用时复水,平铺于培养板底,干燥备用.1g/L胰蛋白酶灌流消化法收获人脐静脉内皮细胞,以1～1.7×108/L分别接种于培养板及铺有羊膜的培养板孔内培养.倒置显微镜及电镜进行形态学观察.待羊膜上细胞生长成完整单层后,将载有血管内皮细胞的羊膜移植到去内皮细胞的猫眼角膜内皮侧,3mo后取角膜植片行组织病理学观察.结果:羊膜及培养板上培养的细胞均在24h完全贴壁,2～3d形成单层,细胞为铺路石样,Ⅷ因子染色阳性.植入猫眼内的人脐静脉内皮细胞在长达3mo的观察期内仍存活,有些甚至增生成多层排列.结论:体外培养及移植状态下,保存人羊膜都不能抑制血管内皮细胞增殖,其抑制角膜新生血管形成的机制可能不是通过内皮细胞途径.
