摘要:
用甲睾酮片饲喂2～4龄赤点石斑鱼(Epinephelus akaara),6周后90%以上的雌鱼性逆转为功能性雄鱼.运用抑制性差减杂交技术(SSH),结合SMART cDNA合成和RACE-PCR方法,从性反转雄鱼性腺中克隆到钙调蛋白基因(ECaM).该基因cDNA全长为582bp,开放阅读框长450bp,编码的蛋白质由149个氨基酸组成,5'端非编码区74bp,3'端非编码区58 bp.虚拟RNA印迹表明,ECaM在性反转雄鱼性腺中表达,而在正常雌鱼性腺中表达微弱.各种组织的半定量RT-PCR显示,ECaM在脑、心、肝、脾、肾都有转录,在精巢和下丘脑中表达水平较高,而在肌肉中表达甚弱.性反转不同时期性腺的半定量RT-PCR及蛋白质印迹表明,性逆转过程中性腺里ECaM的表达量逐渐增加.上述结果提示钙调蛋白可能在赤点石斑鱼性逆转过程中发挥着作用,ECaM可能是促使石斑鱼由雌向雄转变的重要功能基因之一.
