摘要:
目的探讨FQ-PCR定量检测铜绿假单胞菌oprI基因的方法在快速诊断铜绿假单胞菌败血症，及快速判定抗生素体内疗效中的作用。方法（1）制备不同浓度的标准菌株并行药敏实验，找出敏感药物（丁胺卡那霉素）及非敏感药（苯唑西林钠）。（2）SD大鼠120只随机分为5组，分别取不同浓度的菌液尾静脉注入，于实验开始0h、12h、24h、48h各组分别麻醉6只大鼠，采血作血培养、FQ-PCR。（3）SD大鼠72只随机分为治疗组、处理组和对照组，均给予1×10^9CFu／ml尾静脉注入。随后治疗组立即给予敏感抗生素；处理组立即给予非敏感抗生素；对照组同时给予等量生理盐水，均于尾静脉注入。各组于首次注射后0h、12h、24h、48h分别麻醉6只大鼠，采血作血培养、FQ-PCR。结果（1）1×10^9CFu／ml、1×10^8CFU／ml组各时间段血培养均为阳性，FQ-PCR检测，均为阳性。（2）1×10^7CFU／ml、1×10^6CFU／ml组0h、12h血培养均为阳性，1×10^7CFU／ml组24h血培养为阳性，48h为阴性，而1×10^6CFU／ml组24h、48h血培养均为阴性。FQ-PCR检测1×10^7CFU／ml组0h、12h、24h为阳性，48h为阴性。1×10^6CFU／ml组0h、12h、为阳性24h、48h为阴性。（3）1×10^5CFU／ml组各时间段血培养均为阴性，FQ-PCR检测均为阴性。（4）处理后对照组、处理组各时间段血培养均为阳性，而处理后治疗组各时间段血培养均为阴性。FQ-PCR检测三组各时段均为阳性。结论（1）FQ-PCR诊断铜绿假单胞菌败血症与传统细菌培养比较其特异性吻合率达100％，虽灵敏度并未增加，但诊断时间明显缩短。（2）有效抗生素治疗后，运用FQ-PCR诊断灵敏度明显高于细菌培养。（3）利用FQ-PCR检测铜绿假单胞菌oprI基因的拷贝数的变化可能有助于抗生素体内敏感性的判断。
