摘要:
目的：研究左旋一叶荻碱诱导人非小细胞肺癌A549、细胞自噬的机制。方法：常规体外培养人非小细胞肺癌A549细胞株，取对数生长期的细胞传代24h后加入不同浓度（6．25、12．5、25、50、100、200μMol／L）左旋一叶荻碱处理，分别继续培养24、36、48h后，用CCK-8法测定细胞增殖活性；倒置显微镜下观察对照组和各实验组的细胞形态变化；分别用不同浓度（0、20μmol／L）左旋一叶荻碱作用A549细胞48h后，进行单丹磺酰尸胺（monodansylcadaverine，MDC）染色，分别通过荧光显微镜检测细胞自噬发生情况；荧光定量RT-PCR法检测Beclin1在mRNA水平表达变化情况。结果：左旋一叶荻碱可以抑制A549细胞增殖，并且呈浓度和时间依赖性（P〈0．05）。其中，21．204μmol／L左旋一叶荻碱作用A549细胞48h后，细胞死亡率接近50％；倒置显微镜观察到药物作用后细胞形态发生了明显变化；随着左旋一叶荻碱剂量增加，MDC阳性细胞的荧光强度及细胞内MDC荧光颗粒数目明显增加。另外，研究还发现随着药物浓度的上升，自噬基因Beclin 1的表达明显增强。结论：左旋一叶荻碱具有抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖、诱导细胞自噬性凋亡，其作用具有浓度和时间依赖性。左旋一叶荻碱上调自噬基因Beclin 1 mRNA的表达水平可能是其诱导A549细胞自噬性凋亡的机制之一。
